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血清使用中的常見問題

更新時間:2018-05-13點擊次數(shù):1180

血清使用中的常見問題

有關(guān)血清的問題,數(shù)十年來我們始終面臨的是同樣的問題。因此,我們特別整理了一些實驗室里常會遇到的問題,供大家參考:
1、保存血清的方法是什么?
我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。但是,若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。反復(fù)凍融會對血清的品質(zhì)造成不良影響。反復(fù)冰凍融化過程會使血清中的某些物質(zhì)沉淀,降低血清的使用效果。不適當(dāng)?shù)馁A存將迅速降低血清制品的有效成分和穩(wěn)定性。
2、如何解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
 
我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至 37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
3、為什么胎牛血清會出現(xiàn)沉淀(絮狀物)?如何處理?
胎牛血清,所以在解凍過程(包括沒有*解凍)或儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如凝集素、纖維蛋白原和玻連蛋白等)可能會聚集成團(tuán),形成絮狀沉淀或外觀混濁;血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多。在運(yùn)輸過程中,由于時間較長,所以往往有少許解凍,因此也可能稍有沉淀,但這些都不影響血清性能質(zhì)量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞過濾膜。
4、何謂熱滅活?
一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
5、批間差:
所有的血清都是一種成分不確定的混合物,批與批血清之間的組分存在差異。

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1)組織和細(xì)胞培養(yǎng)

2)診斷實驗研究

3)一些特殊稀釋液的添加劑

4)疫苗生產(chǎn)

5)免疫實驗中的封閉劑

6)一些特定蛋白配體的穩(wěn)定劑

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